在日常的生物实验中,我们常常面临一个问题:在配制了200mL的培养基后,仅使用了50mL。那么,剩余的培养基是否可以在下次使用?以及应该如何保存以便将来继续使用呢?可以从以下两个方面进行评估:
一、污染的可能性
在考虑是否保留培养基时,首先要分析使用过程和储存过程中的污染风险。如果存在较大的污染风险,建议不继续使用该培养基。(注:培养基不可重复灭菌)
二、培养基成分的稳定性
根据培养基不同成分的稳定性,可以大致判断其是否适合长期或短期储存。严格来讲,培养基的储存条件及期限应依据具体的效期试验结果来决定,本文所述的方法仅为初步判断。
1. 稳定成分
(1) **稳定的无机盐**:如磷酸盐、氯化钠、氯化钾等,这些成分在光照和热的条件下较为稳定,且与其他成分不会发生氧化还原反应,因此在长期存放过程中不会发生变化。
(2) **琼脂**:在中性和常温环境下,琼脂通常保持稳定,作为培养基的凝固剂,其在适宜的条件下也不会明显变化。(注:酸性条件和结冰会破坏琼脂的结构,未密封的琼脂会逐渐失水变干)
2. 相对稳定的成分
(1) **营养成分**:如蛋白胨、酵母浸粉、牛肉浸粉等,提供微生物成长所需的碳、氮源及维生素,虽然可以耐受短时间高温灭菌,但长期高温和光照会导致维生素逐渐分解,因此在1个月内室温储存通常没有问题,若需长期保存,建议在阴凉处或冷藏避光保存。
(2) **糖醇苷类**:主要提供碳源,部分类型较为稳定,但在高温灭菌后可能会引起焦化,从而降低培养基的pH。含糖量不超过5g/L的情况下,短期不会明显变化,且若同时加入磷酸盐,有助于提高长期存放的稳定性。
3. 不稳定成分
(1) **抗生素类**:部分抗生素对高温敏感,需过滤除菌,但也有如氯霉素、萘啶酮酸等相对稳定的抗生素,它们在高温下不会分解。含抗生素的培养基建议存放在2-8℃。
(2) **天然成分**:如卵黄、血液、血清等,这些不稳定成分通常需现配现用,短期存放应在2-8℃,不建议长期保存。
(3) **氧化还原性成分**:如亚铁离子、半胱氨酸、巯基乙醇酸钠等,易被氧化,需密闭保存。
(4) **染料及酸碱指示剂**:带颜色的染料对光敏感,容易褪色,需避光保存。
(5) **不稳定盐**:如亚硫酸盐、碳酸氢钠等,易分解或被氧化,建议现配现用或冷藏保存。
总结
如果培养基的成分相对稳定,可以在室温短期存储或冷藏长期保存;而若含有不稳定成分,则应现配现用或在2-8℃短期存储。
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