凝血功能紊乱是COVID-19病理机制中的主要因素，但目前关于细胞外囊泡（EVs）和残余细胞（RCs）参与其中的研究仍然相对有限。应用Apogeeflow纳米流式细胞仪分析EVs中的CD61、CD235a、CD45和CD31含量，分别用于检测血小板、红细胞、白细胞和内皮细胞。同时，磷脂酰丝氨酸EVs/RCs的含量通过乳酸粘附素的结合来表示其促凝作用。忽视了细胞来源D-二聚体增加的患者表现出最高的RCs和sEVs数量。血小板的活化，体现在CD61+和乳酸粘附素+mEV及RCs水平的上升，已被证实与凝血障碍相关。低D-二聚体患者可以通过CD41a+sEVs四跨蛋白的特征与对照组区分，这表明循环血小板sEVs亚群的变化可能在COVID-19感染期间具有预后价值。

研究背景与目的: 严重的COVID-19感染常引发频繁的凝血及止血障碍。 COVID-19感染的多种常见实验室检测结果，如血浆D-二聚体和纤维蛋白原水平升高、白细胞增多伴淋巴细胞减少、血小板增多及贫血等，均提示了这一问题。关于COVID-19反应对细胞介导的止血影响的数据尚显匮乏。血小板通过膜表面受体直接与病原菌相互作用，参与免疫反应。活化的血小板会释放异质的EVs，因此被认为在炎症和凝血中发挥重要作用。研究表明，血小板源性EVs在多种炎症条件下均有所增加，包括自身免疫性疾病、癌症及病毒感染。此外，与COVID-19阴性患者相比，住院COVID-19患者中血小板衍生抗体的数量也显著增加。

ApogeeFlow纳米流式细胞仪的应用: 作为检测细胞外囊泡的关键工具，ApogeeFlow纳米流式细胞仪结合了高灵敏度的散射光和荧光检测系统与精准的流体控制，能够提供高分辨率的颗粒分析及细胞类型识别。在EVs检测中，该仪器具显著优势，能够准确区分不同类型和尺寸的EVs（如外泌体、微泡等），并提供关于EVs表面标记物及内部成分的详细信息。这使得尊龙凯时在COVID-19感染研究中成为不可或缺的重要工具。

检测精度与优势: ApogeeFlow纳米流式细胞仪在EVs检测中的优势主要体现在其卓越的灵敏度和多参数分析能力。该仪器可检测低至纳米级的颗粒，满足对微小EVs的精确需求。同时，它能够快速处理大量样本，从而提高研究效率，支撑对疾病的早期诊断和预后评估。

实验结果: 通过流式细胞术分析EV的相关过程已得到有效验证。实验细节包括抗体克隆及散点图分析。将20微升血浆稀释后，使用多种偶联抗体进行孵育，随后在ApogeeFlow系统上进行测量，计数率控制在1000至4000之间。结果显示，高D-二聚体组的CD61、CD235、CD31、CD45和乳酸粘附素的lEVs/RCs阳性均显著高于低D-二聚体组和对照组。

结论: ApogeeFlow纳米流式细胞仪在COVID-19的研究中起着重要作用。它不仅能够检测和分析血小板微粒的数量和活性变化，还能够分析其他细胞外囊泡及病毒颗粒，为深入理解COVID-19的感染机制和免疫反应提供了重要数据支持。其高灵敏度和分辨率使其能够罚准确区分和计数不同尺寸的颗粒，为疾病的早期诊断及其预后评估提供了强有力的支持。