尊龙凯时的人卵巢癌细胞A2780培养说明书提供了详细的细胞培养、传代、冻存和复苏步骤，以确保细胞在实验中的健康和活性。以下是有关A2780细胞培养的关键要点：

一、细胞培养条件

细胞名称：人卵巢癌细胞A2780

生长特性：贴壁生长

冻存条件：无血清冻存液

培养体系：1640培养基 + 10% FBS + 1% L-谷氨酸 + 1% P/S

传代方法：首次建议1:2传代，传代周期为2天更换培养基

备注：使用无菌离心管收集培养基，并留作对比cultivation。如果对比培养效果不理想，建议直接购买尊龙凯时的完全培养基。

二、细胞收到后的处理

收到细胞后，培养至良好状态并注入完全培养液，然后封好瓶口是运输细胞的最佳方法。收到细胞时，请用75%酒精消毒整个细胞瓶，在超净台内进行严格的无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5% CO2培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再进行其他处理。显微镜观察细胞生长情况，并保留不同倍数的照片（建议40x, 100x, 200x各一张），前三天的照片是重要的售后依据，不提供照片视为状态良好。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

若细胞未超过80%汇合度，将完全培养液收集至离心管，留5ml用于培养；若超过80%可进行传代，步骤如下：

1. 弃去培养上清，并用不含钙、镁离子的PBS洗涤细胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶约1-2ml，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，观察细胞状态。
3. 若细胞大部分变圆并脱落，添加5ml完全培养基终止消化。
4. 轻轻吹打，使细胞完全脱落，吸出悬液并转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟。
5. 弃去上清液，重悬于1-2mL完全培养基中。
6. 将细胞悬液按1:2比例分瓶传代，补充新的完全培养基至5-8ml/瓶，放入37℃、5% CO2培养箱中。

b. 细胞冻存

1. 细胞覆盖培养瓶80%时，弃去培养液，PBS清洗一次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶至培养瓶中，待细胞回缩后加入5ml完全培养液。
3. 转移悬液至离心管中，1000rpm离心5分钟。
4. 弃上清，加入1ml强劲生长的无血清冻存液（货号：C7001），混匀后加入冻存管中。
5. 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱，待24小时后可转入液氮罐中。

c. 细胞复苏

1. 快速将冻存管置于37℃水浴中解冻，并用75%酒精消毒外壁。
2. 细胞转移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm离心5分钟。
3. 重悬于5ml完全培养基中，并接种至T25培养瓶，放于37℃、5% CO2培养箱中培养。
4. 第二天更换新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

有些细胞较为特殊，运输过程中可能易脱落，此属正常现象。请将所有培养液收集到离心管，1000rpm离心5分钟，收集上清作对比培养，随后进行相应的消化和重悬步骤。

五、售后条款

1）可重发情况

如果出现以下问题，可申请重发：

1. 运输过程中细胞损失或瓶破损。
2. 细胞受到污染，请在收到产品48小时内提供实验结果。
3. 细胞复苏后存活率不足，需提供真实照片。
4. 以上情况需通过技术人员判断。

2）不予重发情况

如因客户端原因导致的细胞问题，将不予重发，例如污染、操作不当、培养体系不合等情况。

通过尊龙凯时，您可以享受到科技带来的便捷，确保人卵巢癌细胞A2780在您的实验中健康生长。